Cell treat

Seeding -> treatment -> harvest -> WB/PCR

cell seeding 한 24시간 후에 진행

---

 

배지교체

부피/well × (사용할 well × well 수) + a(혹시를 경우를 위해 조금 더 만들어줌) = (가)
최종 농도 (나)㎎/㎖
(가)(나)㎎/(가)㎖ => g/㎖로 변환
=> (가)(나) : 약물의 양
(가) : 배지의 양

ex) HA를 3mg/ml 농도가 되도록 6-wll plate 3판에 친다
6-well × 3 + 2 = 20 well
2ml/well × 20 well = 40ml
40ml당 120mg을 넣어야 함 = > 120mg/40ml => 0.12mg/40ml

∴HA를 0.12mg, 새 배지를 40ml를 섞어주면 됨.

Drop

최종 약물의 양 × 100

ex) HA를 3mg/ml 농도가 되도록 6-wll plate 3판에 친다
3mg/ml × 100 = 300mg/ml

---

 

Method

1. seeding 한 well palte를 꺼낸다.
2. control군과 대조군을 나눈다.
3. control군에는 solvent를 대조군에는 solvent+약물을 넣어준다.
※약물을 넣어줄 때 dish를 기울이고 pipett을 수직으로 세워 지그재그로 약을 넣어준다.

분주 방법

 

---

solvent

PBS, 멸균수, 100%EtOH등을 사용한다. 멸균수는 hydrophilic한 약물을, 100% EtOH는 hydrophobic한 약물에 사용한다. 정유와 같은 기름은 위 solvent 모두에 녹지 않아 DMSO를 사용하여 녹여준다.